1重視儀器的日常維護、保養,使儀器處在最佳工作狀態。o上班前,下班后,首先要搞好室內衛生,進實驗室要換鞋,無關人員不得進實驗室,盡量減少灰塵的污染。?操作人員對儀器的說明書要仔細閱讀,對儀器的原理、操作規程、使用注意事項、細胞分布直方圖的意義、異常報警的含義、引起實驗誤差的因素及儀器維護等要有充分了解,業務知識要扎實,操作熟練,工作責任性強。?抗凝劑的選擇也是一個十分重要的因素,不同的抗凝劑有不同的結果(表1)直接影響到儀器測定的結果。通過實驗,肝素、雙草酸鹽、枸緣酸鈉不能用于血球分析儀的抗凝劑。而EDTA-K2、EDTA-K3、EDTA-Na2做血球分析儀的抗凝劑是比較理想的,不影響白細胞數目及大小,對紅細胞的形態也影響最小,而且可以抑制血小板的聚集。EDTA-Na2價格低廉,但其溶解度較低,不適用于小試管內做抗凝劑,因為小的試管不能充分混和,容易造成血液凝固(在大的試管內可以做血液分析儀的抗凝劑用)。EDTA-K2、EDTA-K3溶解度高,不會出現血液凝固,所以我們日常工作中適用EDTA-K2或ED-TA-K3做血球分析儀的抗凝劑,一般的用量為1.5～2mg抗凝劑可使1ml血液不凝固。?我們使用的采血容器都是真空采血系統,血和抗凝劑充分混和,血樣無凝塊,這樣既可使血液分析達到自動化,又可進行質量控制和保證操作者的安全。通常在采血后4小時內檢查結果。?所用的試劑必須合格,我們使用儀器配套的試劑,包括稀釋液、溶血劑,清洗液等。如果使用國內生產的或自制的試劑,其電導率、滲透壓、pH、直方圖等主要技術指標也盡可能和進口配套試劑相同,才能保證儀器測定的準確性。
2 實驗中的質量控制
每天儀器開機后,儀器進行自檢,首先進行試劑空白計數,要求WBC=0、RBC=0、PLT<5×109/L、HB=0。正常時采用原廠配套的質控物進行測定,在質控范圍內才能進行標本測定。血液分析儀質量控制程序見圖1。我們購買原儀器廠或經國家批準的實驗室的定值物,每天繪制常規工作質控圖,監測工作質量。以測定結果為縱坐標,測定日期為橫坐標,首先把縱坐標居中的位置定為靶值(T),從此點作出一條與橫軸平行的直線稱為靶值線。然后分別在縱軸上下定出允許誤差的警告界限和最大允許限的上下四個點,再分別通過四個點作出四條平等于靶值線的直線,分別稱為警告界限和最大允許界限。每天開機后,先測一次定值標本,要求全部定值物的值都應落在最大允許范圍內,才能進行標本測定。有時我們采用每日上午取正常人標本一份,重復測定5次,取其均值為靶值,作為質控物。當測定到15～20份標本后,重復測定一次質控物與靶值相比較,并按下列規則決定是否失控:WBC±0.3×109/L、HB±2g/L、MCV±2fL、MCH±1.5pg、MCHC±1.5%。凡上下波動超過上述范圍者為失控,本法較為簡便易行。
3 實驗后的質量控制
在前面工作基礎上打出病人結果是否準確可信、有無堵孔、吸量準確否、儀器稀釋度如何等,審查報告結果是十分重要的,判斷是否需要重復檢查或手工操作是質控的最后一關。1看圖形、曲線形態的位置?？窗准毎脱“迮袛嘤袩o血小板凝塊,看血小板圖判斷有無干擾、污染、紅細胞破壞。o成批化驗單看,當日病人標本的各項數值的均值應保持在一定的范圍內。?看白細胞、紅細胞、血小板三總數結合診斷,綜合判斷結果正誤。三者都低是否因為吸量不足或稀釋有誤。微孔是血球分析儀的關鍵部分,也是最易發生堵孔故障的。當儀器半堵孔時,得出結果數值偏低很多,這種情況儀器無任何提示,微孔半堵情況完全靠操作者判定。?白細胞圖與總數及分類值要對照分析,需要時標本可涂片鏡檢。?紅細胞和血小板數對比,通過相互參比判斷兩值可信度:RBC高或正常,PLT低者可信;RBC、PLT都低可疑有堵孔;RBC低、PLT高或正?？梢煽丛\斷。?各報告中異常指示我們均能解釋,整張化驗單與診斷對比要相符。細胞直方圖既給臨床提供診斷數據,也為操作者提供對儀器工作狀態和實驗結果是否可信的監控。必須在仔細分析直方圖后確定是否需要顯微鏡的檢查,再發出報告,這一點在細胞分類計數中更為重要。